脑切片是神经科学研究中的重要技术，指将大脑组织切割成薄片，用于观察细胞结构、神经连接或病理变化。核心步骤包括取材、固定、切片、染色和成像，常用方法有冷冻切片和石蜡切片，应用涵盖疾病诊断、脑功能研究及药物开发。
小鼠小脑切片取自雄性和雌性正常型及Ube3a?/? P9-P11小鼠幼崽，如前所述。简而言之，小脑矢状面切片（300-μm厚）是在MacIlwain组织切割器上切割的，并转移到具有0.4-μm孔径的30-mm Millipore培养插孔的膜上。切片在六孔板中保持培养，培养基为1ml [MEM（Thermo Fisher Scientific, 32360-026）补充25%马血清（Life Technologies, S-HS-EU-015），25%汉克平衡盐溶液（Invitrogen, 14025092），1% P/S，1% Glutamax（Sigma, 35050-038），1.3%葡萄糖（Sigma, G8644）和1.1% 1M HEPES（Thermo Fisher Scientific, 15630-080），在37°C, 5%的CO2环境下培养。
为了清除巨噬细胞细胞，切片在分离后立即用荷兰Liposoma品牌的氯膦酸盐盐脂质体clodronateliposomes或空脂质体（0.5 mg/ml, LIPOSOMA）处理24小时。然后通过在切片上方添加4×103 LPS（100 ng/µl, Sigma, 437627, 18小时）或IL4刺激（20 ng/µl, Peprotech, 214-14, 18小时）正常型或Ube3a?/? BMDMs的1.5 μl滴液直接补充切片，而不接触切片。切片恢复2天后，采用溶血卵磷脂（0.5 mg/ml, Sigma, 62963）处理切片16小时以诱导去髓鞘化。随后，切片被洗涤并在培养中保持6天，然后进行组织学和生化分析。
clodronateliposomes体外清除小鼠脑切片巨噬细胞解决方案：
1. 切片厚度：300μm
2. 浓度：0.5mg/ml
3. 用量：培养基体积1ml，清除剂浓度5mg/ml。即每孔1ml培养基加100ul清除剂clodroanteliposomes（Liposoma，C-005）
4. 时间：24h
clodronateliposomes体外清除小鼠脑切片巨噬细胞效果检测：
如图：巨噬细胞marker为F4/80，显示为红色。通过荷兰Liposoma的Clodronateliposomes（C-005）处理后，脑切片上的巨噬细胞几乎全部清除。
论文信息：
论文题目：UBE3A promotes foam cell formation and counters remyelination by targeting ABCA1 for proteasomal degradation
期刊名称：Nature Communications
时间期卷：16, Article number: 8077 (2025)
在线时间：2025年8月29日
DOI：doi.org/10.1038/s41467-025-62053-w
产品信息：
货号：CP-005-005
规格：5ml+5ml
品牌：Liposoma
产地：荷兰
名称：Clodronate Liposomes and Control Liposomes
办事处：Target Technology(靶点科技)
Clodronate Liposomes氯膦酸盐脂质体清除泡沫巨噬细胞，泡沫巨噬细胞含有过量的细胞内来源于髓鞘的脂质，导致多发性硬化症（MS）等神经退行性疾病的病理。虽然对富含脂质的结构，如改良的脂蛋白和髓鞘的摄取，将巨噬细胞表型重塑为通常与组织修复和免疫抑制相关的表型，但这种解决疾病的表型仅是短暂的。我们和其他研究者发现，巨噬细胞中髓鞘来源脂质的过度积累，尤其在衰老过程中，使泡沫细胞倾向于更具炎症性和促进疾病的表型。这种有害表型的诱导与大脑修复模型中损伤恢复受损密切相关。从机制上讲，细胞内脂质的新陈代谢失调，主要由于胆固醇外流减少，导致细胞脂质含量失衡和有害泡沫巨噬细胞亚群的发展。荷兰Liposoma巨噬细胞清除剂Clodronate Liposomes见刊于Nature Communications：氯膦酸盐脂质体clodronateliposomes体外清除脑切片Cerebellar brain slices 巨噬细胞。
